技術(shù)專(zhuān)欄
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ELISA實(shí)驗中標曲怎么做？
? ? 曲線(xiàn)繪制的使用工具 ? 以下所述中使用的曲線(xiàn)繪制軟件為Curve E xpert1.4, 各位老師們如有需要即可點(diǎn)擊此鏈接下載自行下載使用； ? 標準曲線(xiàn)的繪制 ? 可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制 ELISA 標準曲線(xiàn)，下面以“Curve Expert1.4”軟件為例，繪制 ELISA 標準曲線(xiàn)的方法如下； 1．啟動(dòng)“Curve Expert” 2．X 軸輸入標準品的 OD 值（雙抗夾心輸入 OD-空白值），Y 軸輸入所對應的濃度值
2024-01-19
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實(shí)驗動(dòng)物如何采血及采血管的選擇
實(shí)驗動(dòng)物采血 在實(shí)驗研究中，經(jīng)常會(huì )采集實(shí)驗動(dòng)物血液用于分析和評估動(dòng)物體內的生理和病理情況。根據不同的實(shí)驗設計和要求及動(dòng)物的特性和生理差異，選擇合適的采血方法，可以減少動(dòng)物傷害，提高實(shí)驗的成功率和結果的可靠性。今天小編給大家普及下實(shí)驗動(dòng)物采血方法及采血管的選擇。 01 大鼠、小鼠采血方法 尾尖采血（剪尾采血） 采血方法：動(dòng)物麻醉后并固定，將鼠尾在45-50℃溫水中浸泡數分鐘，也可用二甲苯等化學(xué)藥物涂擦，使局新血管擴張。擦干尾部，用酒
2023-07-27
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WB實(shí)驗之內參選擇
免疫印跡（Western Blot）在研究蛋白相關(guān)實(shí)驗中是關(guān)鍵技術(shù)，由于實(shí)驗周期較長(cháng)、步驟繁瑣，影響因素較多，在實(shí)驗過(guò)程中經(jīng)常會(huì )遇到各種難題。我們需要追根求源，查找并修復問(wèn)題。今天我們講解下WB實(shí)驗中內參的選擇。 什么是內參及內參的作用 內參即是內部參照（Internal control），是指在組織和細胞中表達相對穩定的一類(lèi)蛋白質(zhì)，通常由管家基因編碼。這些蛋白質(zhì)被用作檢測蛋白表達水平變化時(shí)的參照物，以確定實(shí)驗的準確性和可重復性。 在Western Blot實(shí)驗中，我們使用內參其實(shí)就是使用與內參對應的抗體來(lái)檢測內參的
2023-06-14
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ELK Biotechnology總結Elisa實(shí)驗中細胞樣本的制備與保存
細胞培養上清 ?、賹⒓毎囵B上清液吸入離心管中，在2-8℃下以1000×g離心20分鐘，除去細胞碎片和雜質(zhì)，收集上清液備用， ?、跇颖颈４嬖?20℃或-80℃，避免反復凍融。 01 uniprot Q:那什么情況下需要測細胞裂解液，什么情況下是檢測細胞培養液上清呢？ A:首先從細胞培養的形態(tài)（貼壁細胞、懸浮細胞）所檢測蛋白分泌表達位置： 在uniprot蛋白數據庫中Subcellular Location 欄
2022-12-13
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支原體簡(jiǎn)易檢測法
Trizol 法抽提待檢測細胞的RNA（推薦使用 TRIpure總RNA提取試劑 貨號：EP013），反轉錄為CDNA 后裔支原體 檢測引物PCR 檢測細胞支原體污染情況。 支原體檢測引物 Mycoplasma_F01 GGG AGC AAA CAG GAT TAG TAT CCC T Mycoplasma_R01 TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC 40 cycles，63
2022-06-23
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玩轉uniprot數據庫
一、Uniprot蛋白數據庫介紹及使用詳解 Uniprot數據庫是資源最廣、信息最豐富的蛋白質(zhì)數據庫，是查詢(xún)蛋白功能的首選數據庫。Uniprot數據庫由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大子數據庫構成，數據主要來(lái)自于各物種基因組測序完成后得到的全基因蛋白質(zhì)序列，并包含了很多來(lái)自文獻中的蛋白及其功能信息。尤其是swiss-prot 子數據庫，庫中蛋白質(zhì)信息都是手工核對過(guò)的 ，非冗余， 有詳細注釋信息的蛋白數據。作為一名科研工作者，Uniprot數據庫的使用技能應該是必備的技能之一。 （1）UniProtKB（UniProt Knowledgebase）是蛋白質(zhì)序列、
2022-06-07
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RNA樣本準備指南
1、樣本RNA得率以及各類(lèi)項目最低起始量 ? 各樣本Total RNA得率統計（僅供參考）： 測序項目推薦起始量（起始量?jì)H供參考，外泌體不允許18s/28s rRNA有峰）： 表達譜芯片及小RNA測序體液樣本及外泌體項目起始量（僅供參考） ? 2、各類(lèi)樣本準備指南 2.1 動(dòng)物組織/臨床組織采集 ① 取新鮮組織，組織體積要小，盡量長(cháng)寬高≤0.5cm，考慮到可操作性，所切組織塊的大小可參考綠豆顆粒的大小 ② 去除非研究的組織類(lèi)型（如結締組織，脂肪組織等），如果是臨床病變組織的取材要正確判斷病變以及正常組織，應將病變組織
2022-06-06
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淺析免疫共沉淀(Co-IP)原理和詳細實(shí)驗步驟教程
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。 其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細胞內存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。 目前多用精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應后，beads上的prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內結
2022-06-06
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