技術(shù)專欄
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ELISA實(shí)驗(yàn)中標(biāo)曲怎么做？
? ? 曲線繪制的使用工具 ? 以下所述中使用的曲線繪制軟件為Curve E xpert1.4, 各位老師們?nèi)缬行枰纯牲c(diǎn)擊此鏈接下載自行下載使用； ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ? 可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線，下面以“Curve Expert1.4”軟件為例，繪制 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法如下； 1．啟動(dòng)“Curve Expert” 2．X 軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的 OD 值（雙抗夾心輸入 OD-空白值），Y 軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值
2024-01-19
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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如何采血及采血管的選擇
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血 在實(shí)驗(yàn)研究中，經(jīng)常會(huì)采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液用于分析和評(píng)估動(dòng)物體內(nèi)的生理和病理情況。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和要求及動(dòng)物的特性和生理差異，選擇合適的采血方法，可以減少動(dòng)物傷害，提高實(shí)驗(yàn)的成功率和結(jié)果的可靠性。今天小編給大家普及下實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血方法及采血管的選擇。 01 大鼠、小鼠采血方法 尾尖采血（剪尾采血） 采血方法：動(dòng)物麻醉后并固定，將鼠尾在45-50℃溫水中浸泡數(shù)分鐘，也可用二甲苯等化學(xué)藥物涂擦，使局新血管擴(kuò)張。擦干尾部，用酒
2023-07-27
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WB實(shí)驗(yàn)之內(nèi)參選擇
免疫印跡（Western Blot）在研究蛋白相關(guān)實(shí)驗(yàn)中是關(guān)鍵技術(shù)，由于實(shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng)、步驟繁瑣，影響因素較多，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中經(jīng)常會(huì)遇到各種難題。我們需要追根求源，查找并修復(fù)問題。今天我們講解下WB實(shí)驗(yàn)中內(nèi)參的選擇。 什么是內(nèi)參及內(nèi)參的作用 內(nèi)參即是內(nèi)部參照（Internal control），是指在組織和細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定的一類蛋白質(zhì)，通常由管家基因編碼。這些蛋白質(zhì)被用作檢測(cè)蛋白表達(dá)水平變化時(shí)的參照物，以確定實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。 在Western Blot實(shí)驗(yàn)中，我們使用內(nèi)參其實(shí)就是使用與內(nèi)參對(duì)應(yīng)的抗體來(lái)檢測(cè)內(nèi)參的
2023-06-14
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ELK Biotechnology總結(jié)Elisa實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞樣本的制備與保存
細(xì)胞培養(yǎng)上清 ?、賹⒓?xì)胞培養(yǎng)上清液吸入離心管中，在2-8℃下以1000×g離心20分鐘，除去細(xì)胞碎片和雜質(zhì)，收集上清液備用， ②樣本保存在-20℃或-80℃，避免反復(fù)凍融。 01 uniprot Q:那什么情況下需要測(cè)細(xì)胞裂解液，什么情況下是檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清呢？ A:首先從細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)（貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞）所檢測(cè)蛋白分泌表達(dá)位置： 在uniprot蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)中Subcellular Location 欄
2022-12-13
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支原體簡(jiǎn)易檢測(cè)法
Trizol 法抽提待檢測(cè)細(xì)胞的RNA（推薦使用 TRIpure總RNA提取試劑 貨號(hào)：EP013），反轉(zhuǎn)錄為CDNA 后裔支原體 檢測(cè)引物PCR 檢測(cè)細(xì)胞支原體污染情況。 支原體檢測(cè)引物 Mycoplasma_F01 GGG AGC AAA CAG GAT TAG TAT CCC T Mycoplasma_R01 TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC 40 cycles，63
2022-06-23
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玩轉(zhuǎn)uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)
一、Uniprot蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)介紹及使用詳解 Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)是資源最廣、信息最豐富的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)，是查詢蛋白功能的首選數(shù)據(jù)庫(kù)。Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大子數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)成，數(shù)據(jù)主要來(lái)自于各物種基因組測(cè)序完成后得到的全基因蛋白質(zhì)序列，并包含了很多來(lái)自文獻(xiàn)中的蛋白及其功能信息。尤其是swiss-prot 子數(shù)據(jù)庫(kù)，庫(kù)中蛋白質(zhì)信息都是手工核對(duì)過(guò)的 ，非冗余， 有詳細(xì)注釋信息的蛋白數(shù)據(jù)。作為一名科研工作者，Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)的使用技能應(yīng)該是必備的技能之一。 （1）UniProtKB（UniProt Knowledgebase）是蛋白質(zhì)序列、
2022-06-07
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RNA樣本準(zhǔn)備指南
1、樣本RNA得率以及各類項(xiàng)目最低起始量 ? 各樣本Total RNA得率統(tǒng)計(jì)（僅供參考）： 測(cè)序項(xiàng)目推薦起始量（起始量?jī)H供參考，外泌體不允許18s/28s rRNA有峰）： 表達(dá)譜芯片及小RNA測(cè)序體液樣本及外泌體項(xiàng)目起始量（僅供參考） ? 2、各類樣本準(zhǔn)備指南 2.1 動(dòng)物組織/臨床組織采集 ① 取新鮮組織，組織體積要小，盡量長(zhǎng)寬高≤0.5cm，考慮到可操作性，所切組織塊的大小可參考綠豆顆粒的大小 ② 去除非研究的組織類型（如結(jié)締組織，脂肪組織等），如果是臨床病變組織的取材要正確判斷病變以及正常組織，應(yīng)將病變組織
2022-06-06
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淺析免疫共沉淀(Co-IP)原理和詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟教程
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。 其原理是：當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。 目前多用精制的prorein A預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后，beads上的prorein A就能吸附抗原達(dá)到精制的目的。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)
2022-06-06
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